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9 Synthese von Tau-Aggregations- und Depolymerisations-Inhibitoren

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Zur Quantifizierung der Aktivität die Tau-Aggregation zu hemmen bzw. Tau-

Aggregate wieder aufzulösen, kann die ThS-Fluoreszenz ausgenutzt werden. Dabei

ist die Höhe der Emission bei 480 nm proportional zum Gehalt der PHFs. Das

Ausmaß der Inhibition (%) wird gegen die Inhibitorkonzentration (1 pM - 200 µM), wie

in Abbildung 9.11 als Beispiel gezeigt, aufgetragen. Bei der Untersuchung der

Depolymerisationseigenschaft der Substanzen wird zunächst aus 10 µM Tau K19

PHFs gebildet, welche dann ebenfalls mit unterschiedlichen Konzentrationen (1 pM -

200 µM) des Inhibitors versetzt und graphisch aufgearbeitet werden (Abb. 9.11).

Abbildung 9.10. Veränderung der spektralen Eigenschaften von Thioflavin-S während der

Aggregation von Tau. Die ThS-Fluoreszenz kann verwendet werden, um die Aggregation von Tau in

paired helical filaments (PHFs) zu messen. a.u. = arbitrary unit. Das Maximum der ThS-Fluoreszenz

bei 521 nm wird dabei um ein Vielfaches erhöht und ist proportional zu dem Maße der PHF-

Aggregation (ThS (60 µM), ThS (60 µM plus lösliches (soluble) Tau-Protein (K19, 10 µM): ThS (60

µM) plus PHFs (10 µM)). Jede Probe hat eine Konzentration von 2% in DMSO und wird vor der

Messung für 30 min bei Raumtemperatur inkubiert.

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